白虎 av DAMI东谈主巨核细胞白血病细胞的运输及科罚！
发布日期：2024-11-04 06:36 点击次数：99
一、细胞简介： 细胞称号：DAMI东谈主巨核细胞白血病细胞(STR温和正确) 平台编号:zl-056671 从一个巨核细胞白血病患者的血液建造了一株新的东谈主类巨核细胞(Dami)。此细胞悬浮滋长为主，倍增时间24-30小时。至少89%的细胞可与血小板糖卵白(GP)lbandIlb/llla及血型糖卵白单克隆抗体响应。不与抗淋巴腺、单核细胞、粒性白细胞、巨噬细胞抗原的抗体响应。Dami细胞为盘问巨核细胞生化及分化提供了极好的模子。 细胞特质 1）源头：巨核细胞白血病 2）形态：巨核细胞，悬浮为主、极少贴壁 3）含量：>1x106细胞数 4）规格：T25瓶大略1mL冻存管包装 5）用途：仅供科研使用。 二．细胞的培养 培养基及培养冻存条款准备 1）准备RPMI-1640培养基；优质胎牛血清，10%；双抗，1% 注：细胞滋长以悬浮为主、会有极少贴壁表象。 2）培养条款：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。 3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。 三．细胞科罚： 1）冻存细胞的复苏： 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中连忙摇晃解冻，加入到含4-6mL十足培养基的离心管中搀杂均匀。在1000RPM条款下离心3-5min，弃去上清液，十足培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml十足培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜。第二天显微镜下不雅察细胞滋长情况和细胞密度。 2）细胞传代：若是细胞密度达70%-90%白虎 av，即可进行传代培养。 该细胞为悬浮和细微的贴壁细胞白虎 av，传代不错参考以下行为： 1.汇集：将培养瓶中的悬浮的细胞汇集到离心管中。用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。由于细胞贴壁不牢PBS润洗后细胞会零散是以PBS也要回收到离心管中。 2.加入0.25％（w/v）胰卵白酶-0.53mMEDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL）置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞不错相宜延迟消化时间），然后在显微镜下不雅察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并零散连忙拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10